Rhodotorula glutinis: STRAIN ENRICHMENT AND EVALUATION OF PHENYLALANINE AMMONIA LYASE

Abstract

2006 NSIS Honourable Mention, Undergraduate Student Research
Prize Winning Paper

The enrichment of a Rhodotorula glufinis strain and the determination of its
phenylalanine ammonia lyase (E.C.4.3.1.5 - PAL) activity and attempts to measure peroxidase (E.C.1.11.1. 7) activity included conventional mycological procedures along with chemical and microscopic examination. Sabouraud dextrose medium was found to be the most suitable for cell growth, but cells grown on yeast-extract medium exhibited optimal enzyme activity. Growth and PAL activity were measured in yeast cells grown in yeast-extract broth medium for 24-27 h. The appearance of a reddish pink color associated with the yeast cells coincided with the appearance of appreciable PAL activity. The maximum PAL activity and biomass of yeast obtained in the yeast extract medium ranged from 33 to 35 unitslmg dry cells and 7.5 to 8.0 g dry cells/l, respectively. In addition to phenylalanine, Rhodatowla PAL also used phenylalanine methyl-ester as a substrate. No peroxidase activity was found in these R. glutinis cells.

L'enrichissement de la souche de Rhodatarula glutinis et la detenmination de l'activite de la phenylalanine ammoniac-lyase (E.C.4.3.1.5 - PAL) chez cette souche, de meme que les tentatives de mesure de I'activite de la peroxydase (E.C.1 .11.1 .7), ont compris I'utilisation de procedures mycologiques traditionnelles ainsi que des examens microscopiques et chimiques. Nous avons constate que la gelose Sabouraud au dextrose est Ie meilleur milieu pour assurer la croissance cellulaire, mais que l'activite enzymatique est optimale dans les cellules cultivees sur un milieu a base d'extrait de levure. Nousavons mesure la croissance de cellulesde levure culliveesdans un bouillon a base d'extrait de levure pendant 24 a 27 heures et nous avons mesure I'activite de la PAL dans ces memes cellules. L'apparition d'une couleur rose rougeatre associee aux cellules de levure a coIncide avec Ie debut d'une periode d'activite notable de la
PAL. L'activite maxima Ie de la PAL obtenue dans Ie milieu a base d'exlrait de levure a varie de 33 a 35 unites par mg de cellules seches, tandis que la biomasse de levure maximale obtenue dans Ie meme milieu a varie de 7,5 a 8,0 9 de cellules seches par litre. En plus de la phenylalanine, la PAlde Rhodotorula a utilise I'ester methylique de la phenylalanine comme substrat. Aucune activite de la peroxydase n'a ete observee dans ces cellules de R. glutinis.
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